ers សតិបណ្តោះអាសន្នល្អបំផុតសម្រាប់ជាលិកាសត្វធ្វើឱ្យដំណើរការមានភាពងាយស្រួលនិងងាយស្រួល។
D ឌីអេនអេសពិសេសខ្ញុំកាត់បន្ថយការចម្លងរោគឌីអិនអេហ្សែន។
R RNA ដែលមានភាពបរិសុទ្ធខ្ពស់និងអាចប្រើបានគឺសមស្របសម្រាប់កម្មវិធីខ្សែទឹកខាងក្រោម។
■មិនត្រូវការការទាញយកសារធាតុ phenol/chloroform, គ្មានទឹកភ្លៀង LiCl និងអេតាណុល, និងមិនត្រូវការ centrifugation ជម្រាលស៊ីអេសអេសដែលធ្វើឱ្យដំណើរការមានសុវត្ថិភាពនិងអាចទុកចិត្តបាន។
■អេធី-ភីអេសអរ
■ប៊្លុតខាងជើងឌុលប្លូត។
PCR ពេលវេលាពិត។
analysis ការវិភាគបន្ទះឈីប
■ការបញ្ចាំង PolyA, ការបកប្រែនៅក្នុងវីស្តូ, ការវិភាគការពារ RNase និងការក្លូនម៉ូលេគុល។
ផលិតផលទាំងអស់អាចត្រូវបានប្តូរតាមបំណងសម្រាប់អូអឹមឌី/អូអេស។ សម្រាប់ព័ត៌មានលម្អិត,សូមចុចសេវាកម្មផ្ទាល់ខ្លួន (អឹមឌី/អូអឹម)
![]() ![]() |
សម្ភារៈ៖ អំប្រ៊ីយ៉ុង ២០ មីលីក្រាម (១៣ ថ្ងៃ) តំរងនោម ១៥ មីលីក្រាមថ្លើម ១០ មីលីក្រាមស្ពែម ១៥ មីលីក្រាមថេមូស ១០ មីលីក្រាមសួត ២០ មីលីក្រាម វិធីសាស្រ្ត៖ RNA សរុបពីសំណាកជាលិកាផ្សេងៗគ្នារបស់កណ្តុរត្រូវបានបន្សុតដោយប្រើឧបករណ៍ជាលិកាសុទ្ធរបស់ RNAprep ។ លទ្ធផល៖ រូបភាពអេឡិចត្រូលីត agarose ត្រូវបានបង្ហាញខាងលើ។ 2-4 μlនៃ 100 μl eluates ត្រូវបានផ្ទុកក្នុងមួយផ្លូវ។ M: TIANGEN DNA Marker III; ផ្លូវ ១-២៖ អំប្រ៊ីយ៉ុង (១៣ ថ្ងៃ); ផ្លូវទី ៣៖ តម្រងនោម; ផ្លូវ 4-6: ថ្លើម; ផ្លូវលេខ ៧៖ ស្ពែម; ផ្លូវលេខ ៨៖ ធីមុស; ផ្លូវលេខ ៩៖ សួត។ electrophoresis ត្រូវបានធ្វើឡើងក្នុងអត្រា ៦ V/cm រយៈពេល ៣០ នាទីលើជែល agarose 1% ។ |
អេ -១ កោសិកាលីសឬភាពដូចគ្នាមិនគ្រប់គ្រាន់
---- កាត់បន្ថយការប្រើប្រាស់គំរូបង្កើនបរិមាណសតិបណ្ដោះអាសន្ន lysis បង្កើនភាពដូចគ្នានិងពេលវេលា lysis
A-2 ចំនួនគំរូធំពេក
---- កាត់បន្ថយចំនួនគំរូដែលបានប្រើឬបង្កើនបរិមាណសតិបណ្ដោះអាសន្ន។
អេ -១ ការបញ្ជូលកោសិកាឬភាពមិនដូចគ្នា
---- កាត់បន្ថយការប្រើប្រាស់គំរូបង្កើនបរិមាណសតិបណ្ដោះអាសន្ន lysis បង្កើនភាពដូចគ្នានិងពេលវេលា lysis
A-2 ចំនួនគំរូធំពេក
---- សូមយោងទៅលើសមត្ថភាពដំណើរការអតិបរមា។
អេ -៣ អរអេនអេមិនត្រូវបានបកស្រាយទាំងស្រុងពីជួរឈរទេ
---- បន្ទាប់ពីបន្ថែមទឹក RNase-Free សូមទុកវាពីរបីនាទីមុនពេលដាក់ centrifuging ។
អេ -៤ អេតាណុលនៅក្នុងវរជន
---- បន្ទាប់ពីលាងជម្រះម៉ាស៊ីនកណ្តាលម្តងទៀតហើយយកសឺរាុំងបោកខោអាវចេញតាមដែលអាច។
ឧបករណ៍វប្បធម៌អេ -៥ កោសិកាមិនត្រូវបានយកចេញទាំងស្រុងទេ
---- នៅពេលប្រមូលកោសិកាសូមប្រាកដថាត្រូវដកឧបករណ៍វប្បធម៌ចេញតាមដែលអាច។
A-6 កោសិកាដែលរក្សាទុកនៅក្នុងហាង RNA មិនត្រូវបានដាក់ឱ្យមានកំលាំងទេ
---- ដង់ស៊ីតេហាង RNA ធំជាងមធ្យមភាគវប្បធម៌កោសិកា ដូច្នេះកម្លាំង centrifugal គួរតែត្រូវបានបង្កើន។ វាត្រូវបានគេណែនាំឱ្យប្រើម៉ាស៊ីន centrifuge នៅ ៣០០០x ក្រាម។
A-7 មាតិកា RNA ទាបនិងភាពសំបូរបែបនៅក្នុងគំរូ
---- ប្រើគំរូវិជ្ជមានដើម្បីកំណត់ថាតើទិន្នផលទាបបណ្តាលមកពីសំណាក
ក -១ សម្ភារៈមិនស្រស់ទេ
-ជាលិកាស្រស់គួរតែត្រូវបានរក្សាទុកនៅក្នុងអាសូតរាវភ្លាមៗឬភ្លាមៗដាក់ចូលទៅក្នុងទឹកថ្នាំ RNAstore ដើម្បីធានាបាននូវប្រសិទ្ធភាពស្រង់ចេញ។
A-2 ចំនួនគំរូធំពេក
---- កាត់បន្ថយចំនួនគំរូ។
ការចម្លងរោគ A-3 RNasen
---- ថ្វីបើសតិបណ្ដោះអាសន្នដែលបានផ្តល់នៅក្នុងឧបករណ៍នេះមិនមានផ្ទុក RNase ក៏ដោយវាងាយស្រួលក្នុងការចម្លងរោគ RNase ក្នុងកំឡុងពេលដំណើរការស្រង់ចេញហើយគួរតែត្រូវបានដោះស្រាយដោយយកចិត្តទុកដាក់។
អេ -៤ ការបំពុលអេឡិចត្រូលីត
---- ជំនួសសតិបណ្ដោះអាសន្នអេឡិចត្រូលីតហើយត្រូវប្រាកដថាសំភារៈប្រើប្រាស់និងការផ្ទុកសតិបណ្ដោះអាសន្នគ្មានការចម្លងរោគ RNase
ក -៥ ផ្ទុកច្រើនពេកសម្រាប់អេឡិចត្រូលីត
---- កាត់បន្ថយបរិមាណនៃការផ្ទុកគំរូការផ្ទុកអណ្តូងនីមួយៗមិនគួរលើសពី ២ μg។
អេ -១ ចំនួនគំរូធំពេក
---- កាត់បន្ថយចំនួនគំរូ។
អេ -២ សំណាកខ្លះមានមាតិកាឌីអិនអេខ្ពស់ហើយអាចព្យាបាលដោយឌីអិនអេស។
---- អនុវត្តការព្យាបាលដោយឌីអិនអេសដោយមិនប្រើអរអិនអេសទៅនឹងដំណោះស្រាយអរអិនអេដែលទទួលបានហើយអរអេនអេអាចត្រូវបានប្រើដោយផ្ទាល់សម្រាប់ការពិសោធន៍ជាបន្តបន្ទាប់បន្ទាប់ពីការព្យាបាលឬអាចត្រូវបានបន្សុតបន្ថែមដោយឧបករណ៍បន្សុត RNA
សម្រាប់កែវកែវដុតនំនៅ ១៥០ អង្សាសេរយៈពេល ៤ ម៉ោង។ សម្រាប់ធុងប្លាស្ទិកត្រូវបានជ្រមុជចូលក្នុង ០.៥ M NaOH រយៈពេល ១០ នាទីបន្ទាប់មកលាងសម្អាតយ៉ាងហ្មត់ចត់ជាមួយទឹកដែលគ្មានជាតិ RNase ហើយបន្ទាប់មកក្រៀវដើម្បីយក RNase ចេញទាំងស្រុង។ សារធាតុប្រតិកម្មឬដំណោះស្រាយដែលប្រើក្នុងការពិសោធន៍ជាពិសេសទឹកត្រូវតែគ្មានសារធាតុ RNase ។ ប្រើទឹកគ្មានជាតិ RNase សម្រាប់ការត្រៀមលក្ខណៈទាំងអស់ (បន្ថែមទឹកទៅក្នុងដបកែវស្អាតបន្ថែម DEPC ទៅកំហាប់ចុងក្រោយ ០.១% (V/V) អ្រងួនមួយយប់និងស្វ័យប្រវត្តិ) ។
ចាប់តាំងពីការបង្កើតឡើងរោងចក្ររបស់យើងបាននិងកំពុងអភិវឌ្ products ផលិតផលលំដាប់ពិភពលោកដំបូងគេដោយប្រកាន់ខ្ជាប់នូវគោលការណ៍
ដែលមានគុណភាពជាចម្បង។ ផលិតផលរបស់យើងទទួលបានកេរ្តិ៍ឈ្មោះល្អនៅក្នុងឧស្សាហកម្មនិងមានទំនុកចិត្តក្នុងចំណោមអតិថិជនថ្មីនិងចាស់។