■ងាយស្រួលនិងរហ័ស៖ អរអិនអេអរសរុបអាចទទួលបានក្នុងរយៈពេល ៦០ នាទី។
through ទិន្នផលខ្ពស់៖ វាអាចបំពេញតម្រូវការនៃការស្រង់ចេញដោយដៃក៏ដូចជាការស្រង់ចេញជាបាច់នៅលើវេទិកាកម្រិតខ្ពស់ផ្សេងៗ។
■មានសុវត្ថិភាពនិងមិនពុល៖ មិនត្រូវការសារធាតុប្រតិកម្មដូចជាផេនណុល/ក្លរហ្វូមទេ។
ប្រភេទ៖ ការទាញយកអង្កាំប្រភេទមេដែក។
គំរូ៖ ជាលិកាកោសិកានិងឈាម។
គោលដៅ៖ RNA សរុប
កម្រិតចាប់ផ្តើម៖ ៥-២០ មីលីក្រាមមិនលើសពី ១ × ១០7, 0.1-1.5 មីលីលីត្រ
ពេលវេលាប្រតិបត្តិការ៖ ៦០ នាទី
កម្មវិធីខាងក្រោម៖ RT-PCR/RT-qPCR ការសាងសង់បណ្ណាល័យ NGS ។ ល។
ផលិតផលទាំងអស់អាចត្រូវបានប្តូរតាមបំណងសម្រាប់អូអឹមឌី/អូអេស។ សម្រាប់ព័ត៌មានលម្អិត,សូមចុចសេវាកម្មផ្ទាល់ខ្លួន (អឹមឌី/អូអឹម)
អរអិនអិនសរុបត្រូវបានស្រង់ចេញពីថ្លើមកណ្តុរ ២០ មីលីក្រាមជាមួយធីជេអេនម៉ាញ៉េទិកជាលិកា/កោសិកា/ឈាមសរុបអរអេនអេនិងឧបករណ៍ពាក់ព័ន្ធពីអ្នកផ្គត់ផ្គង់ផ្សេងទៀត។ ៥ អ៊ីលនៃអេលឡាអ៊ីត ២០០ μlត្រូវបានផ្ទុកទៅអេឡិចត្រូលីតជែល agarose ១% ៦ វី/ស។ សេចក្តីសន្និដ្ឋាន៖ ទិន្នផលនៃការស្រង់ចេញភាពបរិសុទ្ធនិងស្ថិរភាពនៃឧបករណ៍បញ្ចូនជាលិកាម៉ាញ៉េទិច/កោសិកា/ឈាមសរុបរបស់ TIANGEN គឺប្រសើរជាងអ្នកផ្គត់ផ្គង់ផ្សេងទៀត។ |
|
អរអិនអេសរុបត្រូវបានស្រង់ចេញពីតម្រងនោមកណ្តុរ ២០ មីលីក្រាមដោយមានជាលិកាធីងឃីនម៉ាញ៉េទិច/កោសិកា/ឈាមសរុបអេនអេនអេធីធីនៅក្នុងធីងហ្គេនធីហ្គីដអេស ៣២ ឬ Thermo Kingfisher Flex96 រៀងៗខ្លួន។ ៥ អ៊ីលនៃអេលឡាអ៊ីត ២០០ μlត្រូវបានផ្ទុកទៅអេឡិចត្រូលីតជែល agarose ១% ៦ វី/ស។ សញ្ញាសម្គាល់៖ សញ្ញាសម្គាល់ឌីអិនអេឌីធីងអាន D១៥០០០ សេចក្តីសន្និដ្ឋាន៖ ជាលិកាម៉ាញេទិក/កោសិកា/ឈាមសរុបរបស់ RNA មានទិន្នផលស្រង់ចេញបានល្អនិងភាពបរិសុទ្ធនៅក្នុងម៉ាស៊ីនចំរោះដោយស្វ័យប្រវត្តិផ្សេងៗគ្នា។ |
អេ -១ កោសិកាលីសឬភាពដូចគ្នាមិនគ្រប់គ្រាន់
---- កាត់បន្ថយការប្រើប្រាស់គំរូបង្កើនបរិមាណសតិបណ្ដោះអាសន្ន lysis បង្កើនភាពដូចគ្នានិងពេលវេលា lysis
A-2 ចំនួនគំរូធំពេក
---- កាត់បន្ថយចំនួនគំរូដែលបានប្រើឬបង្កើនបរិមាណសតិបណ្ដោះអាសន្ន។
អេ -១ ការបញ្ជូលកោសិកាឬភាពមិនដូចគ្នា
---- កាត់បន្ថយការប្រើប្រាស់គំរូបង្កើនបរិមាណសតិបណ្ដោះអាសន្ន lysis បង្កើនភាពដូចគ្នានិងពេលវេលា lysis
A-2 ចំនួនគំរូធំពេក
---- សូមយោងទៅលើសមត្ថភាពដំណើរការអតិបរមា។
អេ -៣ អរអេនអេមិនត្រូវបានបកស្រាយទាំងស្រុងពីជួរឈរទេ
---- បន្ទាប់ពីបន្ថែមទឹក RNase-Free សូមទុកវាពីរបីនាទីមុនពេលដាក់ centrifuging ។
អេ -៤ អេតាណុលនៅក្នុងវរជន
---- បន្ទាប់ពីលាងជម្រះម៉ាស៊ីនកណ្តាលម្តងទៀតហើយយកសឺរាុំងបោកខោអាវចេញតាមដែលអាច។
ឧបករណ៍វប្បធម៌អេ -៥ កោសិកាមិនត្រូវបានយកចេញទាំងស្រុងទេ
---- នៅពេលប្រមូលកោសិកាសូមប្រាកដថាត្រូវដកឧបករណ៍វប្បធម៌ចេញតាមដែលអាច។
A-6 កោសិកាដែលរក្សាទុកនៅក្នុងហាង RNA មិនត្រូវបានដាក់ឱ្យមានកំលាំងទេ
---- ដង់ស៊ីតេហាង RNA ធំជាងមធ្យមភាគវប្បធម៌កោសិកា ដូច្នេះកម្លាំង centrifugal គួរតែត្រូវបានបង្កើន។ វាត្រូវបានគេណែនាំឱ្យប្រើម៉ាស៊ីន centrifuge នៅ ៣០០០x ក្រាម។
A-7 មាតិកា RNA ទាបនិងភាពសំបូរបែបនៅក្នុងគំរូ
---- ប្រើគំរូវិជ្ជមានដើម្បីកំណត់ថាតើទិន្នផលទាបបណ្តាលមកពីសំណាក
ក -១ សម្ភារៈមិនស្រស់ទេ
-ជាលិកាស្រស់គួរតែត្រូវបានរក្សាទុកនៅក្នុងអាសូតរាវភ្លាមៗឬភ្លាមៗដាក់ចូលទៅក្នុងទឹកថ្នាំ RNAstore ដើម្បីធានាបាននូវប្រសិទ្ធភាពស្រង់ចេញ។
A-2 ចំនួនគំរូធំពេក
---- កាត់បន្ថយចំនួនគំរូ។
ការចម្លងរោគ A-3 RNasen
---- ថ្វីបើសតិបណ្ដោះអាសន្នដែលបានផ្តល់នៅក្នុងឧបករណ៍នេះមិនមានផ្ទុក RNase ក៏ដោយវាងាយស្រួលក្នុងការចម្លងរោគ RNase ក្នុងកំឡុងពេលដំណើរការស្រង់ចេញហើយគួរតែត្រូវបានដោះស្រាយដោយយកចិត្តទុកដាក់។
អេ -៤ ការបំពុលអេឡិចត្រូលីត
---- ជំនួសសតិបណ្ដោះអាសន្នអេឡិចត្រូលីតហើយត្រូវប្រាកដថាសំភារៈប្រើប្រាស់និងការផ្ទុកសតិបណ្ដោះអាសន្នគ្មានការចម្លងរោគ RNase
ក -៥ ផ្ទុកច្រើនពេកសម្រាប់អេឡិចត្រូលីត
---- កាត់បន្ថយបរិមាណនៃការផ្ទុកគំរូការផ្ទុកអណ្តូងនីមួយៗមិនគួរលើសពី ២ μg។
អេ -១ ចំនួនគំរូធំពេក
---- កាត់បន្ថយចំនួនគំរូ។
អេ -២ សំណាកខ្លះមានមាតិកាឌីអិនអេខ្ពស់ហើយអាចព្យាបាលដោយឌីអិនអេស។
---- អនុវត្តការព្យាបាលដោយឌីអិនអេសដោយមិនប្រើអរអិនអេសទៅនឹងដំណោះស្រាយអរអិនអេដែលទទួលបានហើយអរអេនអេអាចត្រូវបានប្រើដោយផ្ទាល់សម្រាប់ការពិសោធន៍ជាបន្តបន្ទាប់បន្ទាប់ពីការព្យាបាលឬអាចត្រូវបានបន្សុតបន្ថែមដោយឧបករណ៍បន្សុត RNA
សម្រាប់កែវកែវដុតនំនៅ ១៥០ អង្សាសេរយៈពេល ៤ ម៉ោង។ សម្រាប់ធុងប្លាស្ទិកត្រូវបានជ្រមុជចូលក្នុង ០.៥ M NaOH រយៈពេល ១០ នាទីបន្ទាប់មកលាងសម្អាតយ៉ាងហ្មត់ចត់ជាមួយទឹកដែលគ្មានជាតិ RNase ហើយបន្ទាប់មកក្រៀវដើម្បីយក RNase ចេញទាំងស្រុង។ សារធាតុប្រតិកម្មឬដំណោះស្រាយដែលប្រើក្នុងការពិសោធន៍ជាពិសេសទឹកត្រូវតែគ្មានសារធាតុ RNase ។ ប្រើទឹកគ្មានជាតិ RNase សម្រាប់ការត្រៀមលក្ខណៈទាំងអស់ (បន្ថែមទឹកទៅក្នុងដបកែវស្អាតបន្ថែម DEPC ទៅកំហាប់ចុងក្រោយ ០.១% (V/V) អ្រងួនមួយយប់និងស្វ័យប្រវត្តិ) ។
ចាប់តាំងពីការបង្កើតឡើងរោងចក្ររបស់យើងបាននិងកំពុងអភិវឌ្ products ផលិតផលលំដាប់ពិភពលោកដំបូងគេដោយប្រកាន់ខ្ជាប់នូវគោលការណ៍
ដែលមានគុណភាពជាចម្បង។ ផលិតផលរបស់យើងទទួលបានកេរ្តិ៍ឈ្មោះល្អនៅក្នុងឧស្សាហកម្មនិងមានទំនុកចិត្តក្នុងចំណោមអតិថិជនថ្មីនិងចាស់។