កញ្ចប់ PCR ផ្ទាល់ឈាម

ការពង្រីកហ្សែនគោលដៅយ៉ាងឆាប់រហ័សដោយផ្ទាល់ដោយប្រើឈាមជាគំរូដោយគ្មានការស្រង់ចេញ។

ឧបករណ៍នេះប្រើហ្សែនឌីអ៊ីនប៉ូលីម៉េរ៉េសដែលបង្កើតឡើងដោយហ្សែនដើម្បីបង្កើនហ្សែនចម្លងតែមួយនៅក្នុងហ្សែនរបស់មនុស្ស។ ប្រព័ន្ធសតិបណ្ដោះអាសន្នដែលបានធ្វើឱ្យល្អនៅក្នុងឧបករណ៍នេះជួយឱ្យប៉ូលីមេរេសទប់ទល់យ៉ាងខ្លាំងចំពោះការទប់ស្កាត់ PCR inhibitors ដូច្នេះអាចពង្រីក DNA ដោយផ្ទាល់ដោយប្រើឈាមនិងកោសិកាវប្បធម៌ជាគំរូ។ ផលិតផលនេះមានភាពងាយស្រួលក្នុងការដំណើរការនិងមិនត្រូវការជំហានស្មុគស្មាញដូចជាការបន្សុត DNA ឬការព្យាបាលមុនគំរូ។
ឧបករណ៍នេះត្រូវបានផ្តល់ជូនជាម៉ាស្ទ័រម៉ាស្ទ័រ ២ ×ហើយប្រតិកម្មអាចត្រូវបានអនុវត្តដោយគ្រាន់តែបន្ថែមពុម្ពឈាមនិងទ្រនាប់រាវរកដែលត្រូវគ្នា។ វាអាចត្រូវបានគេអនុវត្តលើកោសិកាថនិកសត្វដូចជាមនុស្សកណ្តុរជ្រូកគោក្របីនិងប្រភេទសត្វដទៃទៀតក៏ដូចជាឈាមស្រស់ឬ ៤ អ៊ីញដែលរក្សាបានទាំងអស់ឈាមប្រឆាំងនឹងការកកឈាម (EDTA, citrate, heparin), កំណកឈាមរាវនិងចំណុចឈាមស្ងួត រក្សាទុកនៅលើកាតពាណិជ្ជកម្ម Whatman 903 និង FTA Elute ។

ឆ្មា។ ទេ	ទំហំវេចខ្ចប់
4992529	២០ µl × ១០០ rxn
4992530	២០ µl × ៥០០ rxn

ផ្ញើអ៊ីមែលមកយើង

ព័ត៌មានលម្អិតផលិតផល

ឧទាហរណ៍ពិសោធន៍

សំណួរគេសួរញឹកញាប់

ស្លាកផលិតផល

លក្ខណៈពិសេស

■សាមញ្ញនិងរហ័ស៖ ការពង្រីក PCR អាចត្រូវបានអនុវត្តដោយផ្ទាល់ដោយប្រើឈាមជាគំរូដោយមិនត្រូវការជំហានធុញទ្រាន់នៃការរៀបចំគំរូនិងការទាញយក DNA ។
pur ភាពបរិសុទ្ធខ្ពស់៖ ការរំលងគំរូមុនការព្យាបាលនិងជំហាននៃការស្រង់ចេញឌីអិនអេអាចជួយជៀសវាងការចម្លងរោគនៃសំណាកគំរូ។
through ចរន្តឆ្លងកាត់ខ្ពស់៖ ការកំណត់អត្តសញ្ញាណ PCR សម្រាប់សំណាកខ្នាតធំអាចត្រូវបានអនុវត្តដោយការរួមបញ្ចូលគ្នានូវឧបករណ៍នេះជាមួយចាន PCR ៩៦/៣៨៤ អណ្តូង។
univers ភាពរឹងមាំជាសកល៖ ឧបករណ៍នេះអាចពង្រីកបានយ៉ាងមានប្រសិទ្ធិភាពនូវបំណែក GC ខ្ពស់ឬបំណែកដែលមានរចនាសម្ព័ន្ធអនុវិទ្យាល័យស្មុគស្មាញហើយប្រវែងពង្រីកអាចមានដល់ ៥ គីប។
resistance ភាពធន់នឹងស្ត្រេសខ្លាំង៖ ឧបករណ៍នេះអាចអនុវត្តបានចំពោះប្រភេទផ្សេងៗនិងសំណាកឈាមដែលរក្សាទុកតាមវិធីផ្សេងៗគ្នា។

កម្មវិធី

ផលិតផល PCR នៃឧបករណ៍នេះមានអក្សរ“ អេ” នៅចុង ៣ អ៊ីញដែលអាចប្រើដោយផ្ទាល់សម្រាប់ការក្លូនវ៉ិចទ័រ TA ។ ឧបករណ៍នេះអាចត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការពង្រីកបំណែកឌីអិនអេហ្សែនការវិភាគហ្សែនដែលមានកំរិតខ្ពស់និងការវិភាគហ្សែន (ដូចជាការរកឃើញហ្សែន) ។

ផលិតផលទាំងអស់អាចត្រូវបានប្តូរតាមបំណងសម្រាប់អូអឹមឌី/អូអេស។ សម្រាប់ព័ត៌មានលម្អិត,សូមចុចសេវាកម្មផ្ទាល់ខ្លួន (អឹមឌី/អូអឹម)

មុន៖ TIANcombi DNA Lyse & Det PCR Kit

បន្ទាប់: ឧបករណ៍ PCR ដោយផ្ទាល់របស់ជាលិកាកណ្តុរ

	ដោយប្រើអេឌីធីធីអេធីធីអេសអេសអេសអេសជាគំរូមួយហ្សែន ៤ ដែលមានមាតិកាជីស៊ីផ្សេងៗគ្នាត្រូវបានពង្រីកដោយប៊ីធីអេសភីអរអេស។ ប្រព័ន្ធប្រតិកម្ម PCR គឺ ២០ l ហើយឈាម ១ μlត្រូវបានប្រើជាគំរូ។ M: TIANGEN Marker II; 1: ទំហំបំណែក 1090 bp, មាតិកា GC 68.1%; 2: ទំហំបំណែក 1915 bp, មាតិកា GC 70.4%; ៣៖ ទំហំបំណែក ៤៤៨ bp, មាតិកា GC ៧៤,៨%; ៤៖ ទំហំបំណែក ១៥២៧ ប៊ីភីមាតិកាជីស៊ី ៦១.៥%។ លទ្ធផលពិសោធន៍៖ ឧបករណ៍ PCR ឈាមផ្ទាល់អាចពង្រីកបំណែកឌីអិនអេប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាពជាមួយនឹងមាតិកាជីស៊ីក្នុងចន្លោះ ៦១.៥%-៧៤.៨%ដែលបង្ហាញថាវាមានសមត្ថភាពពង្រីកបំណែកជីអេសស៊ីខ្ពស់។
	ដោយប្រើអេឌីអេធីអេធីអេសអេសអេសអេសឃ្យូឃ្យូមជាមនុស្សគំរូ ៥ ហ្សែនដែលមានប្រវែងខុសៗគ្នា (អេប៊ីប៊ីភីភីឌីអិន ១.០ អិន ២.០ និងអិន ៤.០) ត្រូវបានពង្រីកដោយប៊ីធីអេសភីអរផ្ទាល់។ ប្រព័ន្ធប្រតិកម្ម PCR គឺ ២០ l ហើយឈាម ១ μlត្រូវបានប្រើជាគំរូ។ M: TIANGEN Marker II; ១-៣: ៣ គំរូឈាមផ្សេងៗគ្នា; NTC៖ គ្រប់គ្រងដោយគ្មានថ្នាំបឋម លទ្ធផលពិសោធន៍៖ ឧបករណ៍ PCR ឈាមផ្ទាល់អាចពង្រីកបំណែកដែលមានប្រវែងរហូតដល់ ៤ គីបដោយបង្ហាញថាវាមានសមត្ថភាពពង្រីកបំណែកវែង។
	ដោយប្រើអេឌីធីធីអេធីអេសអេសអេសអេសអេសជាគំរូគំរូឈាមប៊ីធីស៊ីអរភីអេសត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការរកឃើញ PCR នៃគំរូឈាមផ្សេងៗ។ ប្រព័ន្ធប្រតិកម្ម PCR គឺ ២០ l ហើយឈាម ១ μlត្រូវបានប្រើជាគំរូ។ M: TIANGEN Marker II; ១-៩៖ បរិមាណផ្ទុកឈាមគឺ ០,១ μl, ០,២ μl, ០,៣ μl, ០,៤ μl, ១ μl, ២ μl, ៣ μl, ៤ μlនិង ៥ μlរៀងៗខ្លួន; NTC: ត្រួតពិនិត្យដោយគ្មានគំរូ លទ្ធផលពិសោធន៍៖ ឧបករណ៍ចាក់បញ្ចូលឈាមដោយផ្ទាល់មានភាពធន់ទ្រាំទៅនឹងឈាមយ៉ាងខ្លាំងហើយអាចពង្រីកគំរូឈាមជាមួយនឹងជួរផ្ទុក ០.១-៥ μl។
	សំណាកឈាមពីមនុស្សកណ្តុរមាន់និងប្រភេទសត្វដទៃទៀតដែលមានវិធីព្យាបាលផ្សេងៗគ្នាត្រូវបានគេយកធ្វើជាគំរូ។ Blood PCR Kit ត្រូវបានប្រើដើម្បីពង្រីក PRNP (មនុស្ស ៧៥០ ប៊ីភី) អេទីន (កណ្តុរ ២០០ ប៊ីភីភី) និងβ-អាទីន (មាន់ ១,០ ខេប) ។ ប្រព័ន្ធប្រតិកម្ម PCR គឺ ២០ l ហើយឈាម ១ μlត្រូវបានប្រើជាគំរូ។ M: TIANGEN Marker II ។ លទ្ធផលពិសោធន៍៖ ឧបករណ៍ PCR ឈាមផ្ទាល់អាចត្រូវបានអនុវត្តលើសំណាកជាច្រើនហើយការរកឃើញ PCR ដោយផ្ទាល់អាចត្រូវបានអនុវត្តលើគំរូឈាមពីប្រភេទផ្សេងៗគ្នាជាមួយនឹងការព្យាបាលផ្សេងៗគ្នា។

ស៖ គ្មានក្រុមតន្រ្តីពង្រីកទេ

គំរូ A-1

template ពុម្ពមានផ្ទុកនូវសារធាតុមិនបរិសុទ្ធប្រូតេអ៊ីនឬតាឃ្យូអ៊ីនអ៊ីស្យូស។

■ភាពមិនត្រឹមត្រូវនៃពុម្ពគឺមិនពេញលេញទេ - បង្កើនសីតុណ្ហាភាព denaturation ត្រឹមត្រូវនិងពន្យារពេល denaturation ។

rad ការបំផ្លាញគំរូ —— រៀបចំគំរូឡើងវិញ។

A-2 Primer

quality គុណភាពអឹមមឺរ-សំយោគ primer ឡើងវិញ។

rad ការបំផ្លាញសារធាតុ Primer —— បញ្ជូលសារធាតុ primers ដែលមានកំហាប់ខ្ពស់ទៅជាបរិមាណតូចដើម្បីរក្សាទុក។ ជៀសវាងការកកនិងការរលាយច្រើនឬរយៈពេលយូរ ៤ អង្សាសេ។

design ការរចនាមិនត្រឹមត្រូវនៃ primers (ឧទាហរណ៍ប្រវែង primer មិនគ្រប់គ្រាន់, dimer បង្កើតឡើងរវាង primers ។

អេ-៣ មីលីក្រាម²⁺ការផ្តោតអារម្មណ៍

Mg²⁺ កំហាប់ទាបពេក - បង្កើនមីលីក្រាមត្រឹមត្រូវ²⁺កំហាប់៖ បង្កើនប្រសិទ្ធភាពមីលីក្រាម²⁺ ការប្រមូលផ្តុំដោយប្រតិកម្មជាបន្តបន្ទាប់ពី ១ មីល្លីម៉ែត្រទៅ ៣ មីល្លីម៉ែត្រដោយមានចន្លោះពេល ០.៥ មីល្លីម៉ែត្រដើម្បីកំណត់មីល្លីមល្អបំផុត²⁺ ការផ្តោតអារម្មណ៍សម្រាប់គំរូនិង primer នីមួយៗ។

A-4 សីតុណ្ហភាពកំដៅ

temperature សីតុណ្ហាភាពចំហេះខ្ពស់ជះឥទ្ធិពលដល់ការចងទ្រនាប់ទ្រនាប់ទ្រនាប់និងពុម្ព។ - បន្ថយសីតុណ្ហភាពដុតនិងបង្កើនប្រសិទ្ធភាពលក្ខខណ្ឌដោយជម្រាល ២ អង្សាសេ

A-5 ពេលវេលាពន្យាពេល

extension រយៈពេលពន្យាពេលខ្លី - បង្កើនពេលវេលាបន្ថែម។

ស៖ វិជ្ជមានមិនពិត

បាតុភូត៖ គំរូអវិជ្ជមានក៏បង្ហាញពីក្រុមតន្រ្តីលំដាប់គោលដៅផងដែរ។

ក -១ ការចម្លងរោគ PCR

■ឆ្លងកាត់ការចម្លងរោគនៃលំដាប់គោលដៅឬផលិតផលពង្រីក - ប្រយ័ត្នកុំដាក់បំពង់ដែលមានលំដាប់គោលដៅនៅក្នុងគំរូអវិជ្ជមានឬកំពប់វាចេញពីបំពង់ centrifuge ។ ទឹកថ្នាំឬឧបករណ៍គួរតែត្រូវបានស្វ័យប្រវត្តិដើម្បីកំចាត់អាស៊ីតនុយក្លេអ៊ែរដែលមានស្រាប់ហើយអត្ថិភាពនៃការចម្លងរោគគួរតែត្រូវបានកំណត់តាមរយៈការពិសោធន៍ត្រួតពិនិត្យអវិជ្ជមាន។

ination ការចម្លងរោគនៃសារធាតុ - - កំចាត់សារធាតុគីមីហើយរក្សាទុកនៅសីតុណ្ហភាពទាប។

A-2 នាយករដ្ឋមន្រ្តីr

Mg²⁺ កំហាប់ទាបពេក - បង្កើនមីលីក្រាមត្រឹមត្រូវ²⁺ កំហាប់៖ បង្កើនប្រសិទ្ធភាពមីលីក្រាម²⁺ ការប្រមូលផ្តុំដោយប្រតិកម្មជាបន្តបន្ទាប់ពី ១ មីល្លីម៉ែត្រទៅ ៣ មីល្លីម៉ែត្រដោយមានចន្លោះពេល ០.៥ មីល្លីម៉ែត្រដើម្បីកំណត់មីល្លីមល្អបំផុត²⁺ ការផ្តោតអារម្មណ៍សម្រាប់គំរូនិង primer នីមួយៗ។

design ការរចនាបឋមមិនត្រឹមត្រូវហើយលំដាប់គោលដៅមានភាពដូចគ្នាជាមួយនឹងលំដាប់មិនកំណត់គោលដៅ។ —- ការរចនាបឋមឡើងវិញ។

សំណួរ៖ ការពង្រីកមិនជាក់លាក់

បាតុភូត៖ ក្រុមតន្រ្តីពង្រីក PCR មិនត្រូវគ្នានឹងទំហំរំពឹងទុកទាំងធំឬតូចឬពេលខ្លះទាំងក្រុមតន្រ្តីពង្រីកជាក់លាក់និងក្រុមតន្រ្តីពង្រីកដែលមិនជាក់លាក់។

អេ-១ មេ

■លក្ខណៈពិសេសបឋមខ្សោយ

—- ការរចនាបឋមឡើងវិញ។

concentration កំហាប់បឋមខ្ពស់ពេក - បង្កើនសីតុណ្ហាភាព denaturation ត្រឹមត្រូវនិងពន្យារពេល denaturation ។

ក -២ មីលីក្រាម²⁺ ការផ្តោតអារម្មណ៍

លោក Mg²⁺ កំហាប់ខ្ពស់ពេក - កាត់បន្ថយកំហាប់ Mg2+ ត្រឹមត្រូវ៖ បង្កើនប្រសិទ្ធភាព Mg²⁺ ការប្រមូលផ្តុំដោយប្រតិកម្មជាបន្តបន្ទាប់ពី ១ មីល្លីម៉ែត្រទៅ ៣ មីល្លីម៉ែត្រដោយមានចន្លោះពេល ០.៥ មីល្លីម៉ែត្រដើម្បីកំណត់មីល្លីមល្អបំផុត²⁺ ការផ្តោតអារម្មណ៍សម្រាប់គំរូនិង primer នីមួយៗ។

អេ -៣ ប៉ូលីមេរ៉េសដែលអាចធ្វើឱ្យកម្តៅបាន

amount បរិមាណអង់ស៊ីមលើស - កាត់បន្ថយចំនួនអង់ស៊ីមឱ្យបានត្រឹមត្រូវនៅចន្លោះពេល ០.៥ យូ។

A-4 សីតុណ្ហភាពកំដៅ

temperature សីតុណ្ហាភាពនៃការផ្សាភ្ជាប់ទាបពេក-បង្កើនសីតុណ្ហភាពដុតដោយត្រឹមត្រូវឬប្រើវិធីដុតពីរដំណាក់កាល

វដ្ត A-5 PCR

cy វដ្ត PCR ច្រើនពេក - កាត់បន្ថយចំនួនវដ្ត PCR ។

សំណួរៈក្រុមតន្រ្តីស្អិតឬលាប

អេ-១ មេ—— ភាពជាក់លាក់មិនល្អ —— រចនាឡើងវិញនូវថ្នាំ primer ផ្លាស់ប្តូរទីតាំងនិងប្រវែងរបស់ primer ដើម្បីបង្កើនភាពជាក់លាក់របស់វា។ ឬអនុវត្ត PCR ដែលមានសំបុក

អេ -២ គំរូឌីអិនអេ

—— ពុម្ពមិនសុទ្ធ —— សម្អាតពុម្ពឬដកឌីអិនអេជាមួយឧបករណ៍បន្សុទ្ធ។

អេ-៣ មីលីក្រាម²⁺ ការផ្តោតអារម្មណ៍

- មីង²⁺ កំហាប់ខ្ពស់ពេក - កាត់បន្ថយមីលីក្រាមឱ្យបានត្រឹមត្រូវ²⁺ កំហាប់៖ បង្កើនប្រសិទ្ធភាពមីលីក្រាម²⁺ ការប្រមូលផ្តុំដោយប្រតិកម្មជាបន្តបន្ទាប់ពី ១ មីល្លីម៉ែត្រទៅ ៣ មីល្លីម៉ែត្រដោយមានចន្លោះពេល ០.៥ មីល្លីម៉ែត្រដើម្បីកំណត់មីល្លីមល្អបំផុត²⁺ ការផ្តោតអារម្មណ៍សម្រាប់គំរូនិង primer នីមួយៗ។

អេ -៤ ឌីអិនធីភី

—— កំហាប់ dNTPs ខ្ពស់ពេក —— កាត់បន្ថយកំហាប់ dNTP ឱ្យបានសមស្រប

A-5 សីតុណ្ហភាពកំដៅ

- - សីតុណ្ហាភាពនៃការដុតទាបពេក - បង្កើនសីតុណ្ហភាពដុតដោយត្រឹមត្រូវ

ក -៦ វដ្ត

—— វដ្តច្រើនពេក —— បង្កើនចំនួនវដ្ត

សំណួរៈតើឌីអិនអេគំរូប៉ុន្មានគួរត្រូវបានបន្ថែមនៅក្នុងប្រព័ន្ធប្រតិកម្ម ៥០ μl PCR?

សំណួរ៖ តើធ្វើដូចម្តេចដើម្បីពង្រីកបំណែកវែង?

ជំហានដំបូងគឺត្រូវជ្រើសរើសប៉ូលីមេរ៉េសដែលសមស្រប។ តាម៉ីប៉ូលីមែរស្យុងធម្មតាមិនអាចពិនិត្យឡើងវិញបានទេដោយសារខ្វះសកម្មភាព ៣-៥ 'ហើយភាពមិនត្រូវគ្នានឹងកាត់បន្ថយប្រសិទ្ធភាពផ្នែកបន្ថែមយ៉ាងខ្លាំង។ ហេតុនេះហើយបានជាតាម៉ីប៉ូលីមែរស្យុងធម្មតាមិនអាចពង្រីកបំណែកគោលដៅធំជាង ៥ គីឡូបៃប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាពឡើយ។ Taq polymerase ជាមួយនឹងការកែប្រែពិសេសឬ polymerase ភាពស្មោះត្រង់ខ្ពស់ផ្សេងទៀតគួរតែត្រូវបានជ្រើសរើសដើម្បីបង្កើនប្រសិទ្ធភាពផ្នែកបន្ថែមនិងបំពេញតម្រូវការនៃការពង្រីកបំណែកវែង។ លើសពីនេះការពង្រីកបំណែកវែងៗក៏តម្រូវឱ្យមានការកែតម្រូវដែលត្រូវគ្នានៃការរចនាបឋមពេលវេលាកំណត់ពេលវេលាការពន្យារពេល pH បណ្តោះអាសន្ន។ ល។ ដើម្បីបងា្ករការបំផ្លាញគំរូពេលវេលានៃការបដិសេធនៅ ៩៤ អង្សាសេគួរតែត្រូវបានកាត់បន្ថយមកត្រឹម ៣០ វិនាទីឬតិចជាងនេះក្នុងមួយវដ្តហើយពេលវេលាដើម្បីបង្កើនសីតុណ្ហភាពដល់ ៩៤ អង្សាសេមុនពេលពង្រីកគួរតែតិចជាង ១ នាទី។ លើសពីនេះការកំណត់សីតុណ្ហភាពផ្នែកបន្ថែមនៅប្រហែល ៦៨ អង្សាសេនិងការរចនាពេលវេលាបន្ថែមយោងតាមអត្រា ១ គីប/នាទីអាចធានានូវការពង្រីកប្រសិទ្ធិភាពនៃបំណែកវែង។

សំណួរ៖ តើធ្វើដូចម្តេចដើម្បីធ្វើឱ្យប្រសើរឡើងនូវភាពស្មោះត្រង់របស់ PCR?

អត្រាកំហុសនៃការពង្រីក PCR អាចត្រូវបានកាត់បន្ថយដោយប្រើឌីអិនអេប៉ូលីមែរជាច្រើនដែលមានភាពស្មោះត្រង់ខ្ពស់។ ក្នុងចំណោមតាមិលឌីអិនអេប៉ូលីមែរទាំងអស់ដែលបានរកឃើញរហូតមកដល់ពេលនេះអង់ស៊ីមភីហ្វូមានអត្រាកំហុសទាបបំផុតនិងភាពស្មោះត្រង់ខ្ពស់បំផុត (សូមមើលតារាងភ្ជាប់) ។ បន្ថែមពីលើការជ្រើសរើសអង់ហ្ស៊ីមអ្នកស្រាវជ្រាវអាចកាត់បន្ថយអត្រាផ្លាស់ប្តូរ PCR បន្ថែមដោយធ្វើឱ្យប្រសើរឡើងនូវលក្ខខណ្ឌប្រតិកម្មរួមទាំងការធ្វើឱ្យប្រសើរនូវសមាសភាពសតិបណ្ដោះអាសន្នការផ្តោតអារម្មណ៍នៃប៉ូលីមេរ៉េសដែលអាចទ្រាំទ្របាននិងបង្កើនចំនួនវដ្ត PCR ។

សរសេរសាររបស់អ្នកនៅទីនេះហើយផ្ញើមកយើង

ប្រភេទផលិតផល

ហេតុអ្វីជ្រើសរើសអាមេរិក

ចាប់តាំងពីការបង្កើតឡើងរោងចក្ររបស់យើងបាននិងកំពុងអភិវឌ្ products ផលិតផលលំដាប់ពិភពលោកដំបូងគេដោយប្រកាន់ខ្ជាប់នូវគោលការណ៍
ដែលមានគុណភាពជាចម្បង។ ផលិតផលរបស់យើងទទួលបានកេរ្តិ៍ឈ្មោះល្អនៅក្នុងឧស្សាហកម្មនិងមានទំនុកចិត្តក្នុងចំណោមអតិថិជនថ្មីនិងចាស់។

ការសាកសួរ